在真核细胞中DNA折叠成为染色质是如何影响转录的?你可以应用C-负转录单元解决这个问题。这个模板在RNApolⅡ及四个转录因子(TFⅡA、TFⅡB、TFⅡD和TFⅡE)存在下能很好地转录。
为了检验染色质对转录的影响,首先将模板装配成核小体(核小体来自蛙卯母细胞抽提物)并纯化染色质模板,然后加入转录组分,结果没有发生转录(图13-3-48)。然后改变步骤,首先,在缺少NTPs的情况下将模板和转录组分一起温育,然后将模板装配为核小体,再纯化染色质模板。现在,当要再加入转录组分时,转录顺利进行就如在裸露的DNA模板上进行的转录一样,这样得出结论:一个或多个转录组分一定同模板结合,然后使启动子可以接近。
为了更进一步了解这种现象,再做两个附加实验。在第~个实验中,在温育过程中少加一种转录组分;在第二个实验中,在进行转录分析中少加一种转录组分。
A.由于转录过程中RNA聚合酶的作用,活化的染色质对DNaseⅠ才有优先敏感性
B. 凡有基因表达活性的染色质DNA,对DNase Ⅰ的降解作用比没有转录活性的染色质DNA要敏感得多
C. 超敏感序列与其他蛋白质的结合阻止了核小体的装配可能是超敏感位点的形成原因
D. 超敏感位点的建立是起始转录的必要条件之一
A.是一种能与DNA的κB序列结合的核蛋白因子
B.与IκB结合以无活性状态被锚定于胞质
C.IκB磷酸化,NF-κB得以活化
D.活化的NF-κB入核调节基因转录
E.NF-κB磷酸化后失去活性
利用一个包含纯化的RNA聚合酶的核心酶、DNA模板、σ因子以及标记核苷酸(32pppN)的系统,来研究σ因子在原核转录中的作用。在10-10mol和10-11mol两种不同浓度的核心酶催化下32P掺入到RNA的图如下所示,σ因子浓度恒定为10-12mol。
A.是与真核基因转录有关的蛋白质因子
B.可结合顺式作用元件
C.可结合RNA聚合酶
D.作用都是增强转录过程
E.可分为基本转录因子和特异性转录因子