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图12-3-3示两个同源DNA结构。在每个分子中(+)链互补于其本身的(-)链以及另一分子的(-)链。分子的排列方向是两
图12-3-3示两个同源DNA结构。在每个分子中()链互补于其本身的(-)链以及另一分子的(-)链。分子的排列方向是两个b端的碱基顺序同源。上面的分子比下面的分子短,少了一段a端(见图12-3-3)。使分子杂交并发生分支移动。结果会得到图中(1)至(6)中的哪种结构?
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图12-3-3示两个同源DNA结构。在每个分子中()链互补于其本身的(-)链以及另一分子的(-)链。分子的排列方向是两个b端的碱基顺序同源。上面的分子比下面的分子短,少了一段a端(见图12-3-3)。使分子杂交并发生分支移动。结果会得到图中(1)至(6)中的哪种结构?
图12-3-18中表示出了两个同源的亲本双链和可能存在的两种重组产物在能产生所示重组产物的亲本双链间画出的连接体(Holliday junction)。连接体的每条链的左端标明是5'-末端还是3'-末端,以清楚地显示亲本双链与重组体双链之间的关系。写出每种类型的重组产物产生时需要切开哪些链。最后,请画出经过一次复制后的重组体。
根据图12-3-14(A),画出图12-3-14(B)中所示的同源序列的交换重组产物,在图中,用一条线代表了DNA双链,用箭头代表了同源重组的目的基因。
两份几乎相同的DNA样品(例如从突变型和野生型病毒X得到的DNA分子)混合、变性、再退火,可得如图2-3-24所示的同源双链和异源双链。同源双链含来自同一份DNA样品的两条链,而异源双链则含来自两份不同DNA样品的链。两份DNA样品的顺序差异导致了异源双链中因不能形成氢键配对而保持单链状态的非互补区域。若这些区域长度大于50至100个核苷酸;则在电镜下呈环状。图B显示两种常见的异源双链结构。异源双链DNA的检测对于大片段缺失、碱基添加以及取代的定位是很有效的方法。试利用图中的数据构建一个野生型DNA的图谱,算出突变型中片段缺失的位置。
如图为某二倍体动物精原细胞的分裂示意图。下列叙述错误的是()。
A.图①是有丝分裂后期
B.图②中染色体数:核DNA分子数=1∶2
C.图③中有同源染色体
D.图④是减数第一次分裂后期
图Q13.2亲代与重组的双螺旋
你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段,其中一个长为400bp,另一个长900bp,你想要如图16-3-20(1)所示将它们连接起来产生一个杂合基因,如果你的推测是正确的话,就会得到令人惊奇的新物质。
你在DNA连接酶存在情况下将两种片段混合在一起并且进行孵育,30分钟后和8小时后,你取一些样品进行琼脂糖凝胶电泳分析,你惊讶地发现连接得到了一系列复杂的DNA片段而不是所需的1.3kb小片段,并且发现孵育时间越长,小片段浓度越低而大片段浓度增加,如果你用BamHI切割连接后的重组体,你会重新获得开始的两片段(图16-3-20(2)A)。
令人吃惊的是,你将从琼脂糖凝胶中纯化得到的1.3kb片段用BamHI消化,检查它的结构,与预想的一样,可以得到最初的两片段(图16-3-20(2)B)。这就可以确定这是你所需的结构。但是,你用EcoRl消化另一份样品,你希望通过消化得到300bp的片段和700bp的片段,但你跑的电泳是一系列DNA片段(图16-3-20(2)B)。
片段重新连接起来,得到如图Q25.1所示的结果。
图025.1杂合基因的结构
于是将这两种片段混合起来,并在连接酶的存在下进行温育,分别在30min和8h取样进行凝胶电泳分析。令人惊讶的是,连接产物并非是理想中的1.3kb的重组分子,而是一种复杂的片段模式[图Q25.2(a)]。同时发现随着温育时间的延长,较小片段的浓度逐渐降低,大片段的浓度逐渐增加。如果用BamH Ⅰ来切割连接后的混合物,则起始的片段可以重新产生[图Q25.2(a)]。
从凝胶中分离纯化出1.3kb的片段,并取出一部分用BamH Ⅰ进行切割,以检查它的结构。正如预料的一样,出现了两个原始的带[图Q25.2(b)]。但是用EcoR Ⅰ切割另一部分样品,希望能够产生两个300bp和一个长度为700bp的核苷酸片段,然而,凝胶电泳的结果,令人惊奇[图Q25.2(b)]。
图Q25.2纯化DNA片段连接后电泳检测
有两个系统发育上十分接近的物种,它们染色体中的(G+C)%含量不同,A株(G+C)含量为55%而B株是68%。同源及异源转化/重组实验表明:来自(G+C)%低的DNA易于转化入(G+C)%高的生物体/基因组中,反之则不然。请说明原因。
通过分析一个类似增强子元件(SRE血清反应元件)的一系列缺失突变体,发现在转录起始点上游的300核苷酸序列对于在加入血清后增强转录是必需的。通过建立包含有人β-球蛋白部分基因(它编码一个极为稳定的mRNA)的各种杂交基因来研究c-fos mRNA的稳定性。球蛋白基因的结构和两种杂交基因如图13-3-60(1)B、C、D所示。在低血清浓度下,当杂交基因转染鼠细胞时,24小时后它才对血清作出反应(图13-3-60(2)B、C所示)。