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题目内容（请给出正确答案）

[单选题]

细菌的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中的主要作用是（)

A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性

B.有利于对目的基因是否导入进行检测

C.增加质粒分子的分子量

D.便于与外源基因连接

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第1题

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质粒pHUBI DNA是双链环状，长5.7kb(5.7×10³个碱基对)。这个质粒带有某基因，它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点：EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性；在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形，在圆周上以5.7kb总长标出刻度。

表16-2-11

酶混合物

片段长度(kb)

EcoRI

EcoRI，BamHI

EcoRI，HpaI

EcoRI，SalI

EcoRI，BglII

EcoRI，PstI

PstI，BglII

BglII，HpaI

5.7

0.4，5.3

0.5，5.2

0.7，5.0

1.1，4.6

2.4，3.3

1.3，4.4

0.6，5.1

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第2题

你试图描述一个特殊基因的特征，最后你成功地获得了产生可供选择的细菌突变株，但为了鉴别该基因，你不得不通过下列什么方法来证明分离的基因单独对观察到的突变株表型起作用？

A.把诱变剂加入细菌培养基中，分离与其野生型表型对应的回复突变株。

B.不能得到反式互补，因在带有突变基因的质粒对突变菌株的转化中，将不贮存野生型。

C.不能获得反式互补，因通过带有突变基因的质粒来进行野生型的转化，将不会产生突变株。

D.有反式互补，因通过带有突变基因的质粒进行突变型细菌的转化能产生野生型表型。

E.获得反式互补，因通过带有野生型基因的质粒进行突变型细菌的转化能贮存野生型表型。

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第3题

野生型Tn3和几种突变体Tn3转座到一个质粒上，并进行ApR抗性的筛选。请指出下列突变对转座产生的产

物类型及转座频率的影响。假设每种突变至少完全消除一个相关功能，但需要记住某些蛋白质具有双重功能。所用细菌菌株为RecA-，以阻止同源重组的发生。 (1)解离酶基因的点突变。 (2)解离酶的启动子突变。 (3)转座酶基因的点突变。 (4)转座酶的启动子突变。 (5)bla(β-内酰胺酶)基因的点突变。 (6)解离位点(res)发生突变。

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第4题

二氢叶酸还原酶缺陷型（dfr-)仓鼠细胞株用质粒转化，该质粒含dfr-结构基因，并与激素诱导基因的启动基因以及另

二氢叶酸还原酶缺陷型(dfr^-)仓鼠细胞株用质粒转化，该质粒含dfr^-结构基因，并与激素诱导基因的启动基因以及另一个在本系统是显性选择标记的基因xgp相连。转化细胞根据合成Xgp的能力进行选择。所有这些挑选的细胞也都能合成Dfr。用剂量递增的氨甲蝶呤处理细胞。选择出一株细胞，比出发的转化细胞对氨甲蝶呤的抗性高200倍，同时Dfr酶含量也高200倍。

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第5题

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有-8.8kb含四环素抗性基因的重组质粒，要将其转入大肠埃希氏菌DH₅α(对四环素没有抗性)中，用什么方法可以实现这一过程，写出实验步骤

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第6题

正在研究的是包含三个基因的基因家族。在转录开始后差不多同一时间里细胞质中出现三个基因的mRNA分子。曾经提

出如下假设：合成的是单个转录物，以三种不同的方式(可能是随机地产生三种mRNA分子)加工。主要证据是所有这三种mRNA分子的帽子邻接着同一顺序的四个核苷酸。整个基因家族已经作为一个单位克隆在质粒pBR322中。将质粒DNA部分变性，并在DNA-RNA形成杂交的条件下加入所有这三种mRNA分子。这样，一些质粒分子具有R环，也就是说，DNA的一股链与mRNA结合，而不是与其互补链结合并形成泡状结构。在含这些mRNA的质粒的电镜照片中可以看到图13-3-71中的分子(也能见到其他形式的分子)。上述假设正确吗？