下列哪个不属于高度纯化：（)

A.层析

B.吸附法

C.亲和层析

D.凝胶层析

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第1题

由于目的蛋白质和杂蛋白分子量差别较大，拟根据分子量大小分离纯化并获得目的蛋白质，可采用()

A.SDS 凝胶电泳

B.盐析法

C.凝胶过滤

D.吸附层析

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第2题

平滑肌肌浆球蛋白并不像骨骼肌中的肌浆球蛋白。它只在它的轻链磷酸化后才与肌动蛋白相互作用。磷酸化过程由胞

内Ca²⁺浓度的变化来控制，而Ca²⁺又是由钙调素(CaM)介导的。你已从平滑肌中纯化出肌浆球蛋白轻链激酶。但此激酶在有或无Ca²⁺存在时活性是一样的。你也可以加入蛋白酶抑制剂来保证纯化过程中激酶的完整性。在此条件下抽提物中的激酶元活性，除非有Ca²⁺存在。

表14-3-14 蛋白酶抑制剂对纯化肌动蛋白轻链激酶活力的影响
纯化表格	加入的试剂混合物	相对活力
负型抑制剂	没有	50
负型抑制剂	Ca²⁺	50
负型抑制剂	钙调素	50
负型抑制剂	Ca²⁺/钙调素	50
正型抑制剂	没有	1
正型抑制剂	Ca²⁺	1
正型抑制剂	钙调素	1
正型抑制剂	Ca²⁺/钙调素	100

通过凝胶过滤和离子交换层析部分地纯化激酶，接着在Ca²⁺存在下通过钙调素亲和柱。使人高兴的是，所有有活性的激酶均粘在柱子上，并且当用Ca²⁺螯合剂EDTA洗脱时能定量地洗脱下来。根据表14-3-14所示，纯化酶现在像所希望的那样，这表明了酶绝对依赖于Ca²⁺/钙调素。在此基础上，你可直接通过钙调素亲和柱挽救最初纯化的酶样品。令人惊奇的是激酶直接通过柱子，不论Ca²⁺存在与否。

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第3题

由MNNG（亚硝基胍)引起的诱变损伤的本质以及它从DNA上被修复的机制可以用下面的实验来鉴定。为了确定诱变损伤

由MNNG(亚硝基胍)引起的诱变损伤的本质以及它从DNA上被修复的机制可以用下面的实验来鉴定。为了确定诱变损伤的本质，未经处理的细菌和已用低剂量MNNG处理的细菌都在含50μg/ml的³H-MNNG的培养物中培养10min。分离它们的DNA并水解成核苷酸，然后经过纸层析分析放射性的嘌呤，结果如图Q12.2所示：

图Q12.2 层析法分离未被处理和已被低剂量MNNG处理的细菌DNA中被标记的甲基化嘌呤实线表示未被处理细菌DNA中的甲基化嘌呤；虚线表示MNNG处理的细菌所得结果

为了研究诱变损伤切除的机制，首先纯化负责切除的酶，把不同量的酶(相对分子质量19000)和已被³H标记含0.26pmol突变碱基的DNA一起温育，分析切除动力学。在不同时间取样，分析DNA以确定还存在多少突变残基(图Q12.3)。当在5℃而不是37℃时重复这个实验时，虽然最初的切除速率较慢，却得到一样的终点。