raf-1基因编码Ser/Thr蛋白激酶可能在脊椎动物发育中起重要作用。在果蝇中,当这个基因的同系物缺失时,胚胎能
raf-1基因编码Ser/Thr蛋白激酶可能在脊椎动物发育中起重要作用。在果蝇中,当这个基因的同系物缺失时,胚胎能正常发育过囊胚期,但此后的发育开始异常,产生一缺少后面四片段的平截胚胎。在脊椎动物中,成纤维细胞生长因子(FGF)增进中胚层诱导和后期发育。据认为Raf-1蛋白与FGF触发信号传导途径。Raf-1蛋白有一个Ser/Thr激酶区,即C末端半分子和一个在氨基末端的调节区,该区除非收到正确信号,否则会抑制激酶活性。
为了检验Raf-1的作用,你构建出一个你希望是负显性的cDNA,在ATP结合区改变了一主要的残基。这一突变了的cDNA编码的蛋白无激酶活性,命名为NAF(没活性的Raf)。从Raf-1cDNA到NAF、cDNA中制得RNA,分别注射或混合注射到二细胞期的蛙胚中以判断对蛙发育的影响,结果在表16-3-45中,某些注射后产生的元尾表型很明显(见图16-3-45)。
表16-3-45 R-1和NAF RNA注入2细胞胚胎 | ||||
注入 | 存活总数 | 表 型 | ||
正常 | 短尾 | 其他不正常 | ||
raf-I RNA NAF RNA raf-I and NAF RNA Water uninjected | 94 80 93 101 80 | 75% 40% 73% 92% 99% | 0% 36% 5% 0% 0% | 25% 24% 22% 8% 1% |