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[单选题]
需进行DNA部分酶切时，控制下列哪种条件最合适（)
A.反应时间
B.反应体积
C.PH
D.限制酶量
E.反应温度
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A.DNA连接酶→DNA聚合酶→核酸内切酶
B.DNA聚合酶→核酸内切酶→DNA连接酶
C.核酸内切酶→DNA聚合酶→DNA连接酶
D.核酸内切酶→DNA连接酶→DNA聚合酶
A.不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
B.同聚尾法连接不仅连接效率高，也易回收插入的片段。
C.限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性，将有利于重组连接。
D.Mg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
E.平末端连接时，在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。
A.聚半乳糖醛酸苷酶基因上导入一个控制活性的DNA序列，可以抑制西红柿中聚半乳糖醛酸苷酶的表达
B.果胶降解酶与西红柿成熟、软化和腐烂有关
C.聚半乳糖醛酸苷酶是果胶降解酶
D.转基因西红柿成为早熟的西红柿
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后，连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间，二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1)，分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后，电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后，用载体上的DNA作为探针进行杂交，结果如下图所示：
1.jpg)
假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点，标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2)，用同样的酶切、电泳、转膜后，以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交，结果如下图所示：
2.jpg)
画出克隆2的图，标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切，并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交，结果如下图所示：
3.jpg)
其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
1.jpg)
(1)EcoRⅠ到HindⅢ位点间的片段有多大？ (2)画出HhaⅠ和Sau3A的酶切位点。 (3)标记有32p的同样DNA片段，用HhaⅠ完全酶切，进行电泳，那么用EB染色或放射自显影，会分别得到什么样的图？
