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用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子，得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每条链的顺序，将5'-末端用32P标记(通过多核苷酸激酶催化的反应)，再用Maxam-Gilbert序列法测定。切得片段的混合物经电泳后可得到如图2-3-50B所示的图谱(图中迁移方向为自上而下，片段越小移动距离越远)。仔细观察一下电泳图谱，回答下列问题：
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图13-3-5所示的是一段基因组DNA的限制酶图谱以及与其对应的cDNA限制酶谱图。这段基因组DNA中有多少个内含子？它们在哪里？
限制酶简写：B：BamHI；C：ClaI；H：HindⅢ；R：EcoRI；S：SalI；AAA：poly(A)尾。
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(1)EcoRⅠ到HindⅢ位点间的片段有多大？ (2)画出HhaⅠ和Sau3A的酶切位点。 (3)标记有32p的同样DNA片段，用HhaⅠ完全酶切，进行电泳，那么用EB染色或放射自显影，会分别得到什么样的图？
噬菌体中DNA分子具有短的互补的单链末端，当它感染细菌时该分子环化。图16-3-7的A和B分别显示用Bam限制酶处理游离的DNA分子后得到的限制酶图谱和凝胶电泳条带。从受感染的细胞中分离出DNA进行特性研究。在某些条件下酶解后的片段经电泳后结果如图16-3-7C所示。试问在这些条件下DNA呈怎样的结构？
从正常细胞和反转录病毒(不含癌基因)感染的细胞(克隆1)中，分别分离出DNA，用限制酶酶切后做电泳并转膜。以某原癌基因的cDNA作探针进行杂交，结果如下图所示：
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反转录病毒插入位置在哪里？
A.体内突变
B. 完全酶切后连接
C. 部分酶切
D. 先用甲基化酶修饰后再酶切
A.用两种限制酶分别切割运载体和人类胰岛素基因
B.用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌
C.通过受体表现出来的外在性状来检测重组DNA是否已导入受体细胞
D.重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人类胰岛素
质粒pHUBI DNA是双链环状，长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因，它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点：EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性；在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形，在圆周上以5.7kb总长标出刻度。
| 表16-2-11 | |
| 酶混合物 | 片段长度(kb) |
| EcoRI EcoRI，BamHI EcoRI，HpaI EcoRI，SalI EcoRI，BglII EcoRI，PstI PstI，BglII BglII，HpaI | 5.7 0.4，5.3 0.5，5.2 0.7，5.0 1.1，4.6 2.4，3.3 1.3，4.4 0.6，5.1 |
A.一般情况下，用同一种限制酶切割质粒和含有目的基因的片段，但有时可用两种限制酶分别切割质粒和目的基因，这样可避免质粒和质粒之间、目的基因和目的基因之间的连接
B.标记基因的作用：筛选、检测目的基因是否导入受体细胞，常见的标记基因有抗生素抗性基因、发光基因（表达产物为带颜色的物质）等
C.在基因表达载体中，启动子（DNA片段）转录出起始密码子（RNA）；终止子（DNA片段）转录出终止密码子（RNA）
D.用CaCl2处理大肠杆菌使之转变为感受态，细胞透性加大有利于DNA透过大肠杆菌
