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关于反转录PCR的描述,不正确的是()
A.首先应将RNA转化为cDNA才能进行PCR
B.除了使用DNA聚合酶外,还应使用反转录酶
C.常用的反转录酶有AMV、MMLV,它们作用的最适温度不同
D.oligo(dT)理论上可以将所有的mRNA进行反转录反应
E.反转录酶不需要引物进行反转录反应
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A.首先应将RNA转化为cDNA才能进行PCR
B.除了使用DNA聚合酶外,还应使用反转录酶
C.常用的反转录酶有AMV、MMLV,它们作用的最适温度不同
D.oligo(dT)理论上可以将所有的mRNA进行反转录反应
E.反转录酶不需要引物进行反转录反应
A.也被称为多重引物PCR或复合PCR
B.是在同一PCR反应体系里加入两对或两对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应
C.其反应原理、反应试剂和操作过程与一般PCR完全不同
D.美国科学家JSChamberlain在Duchenne型肌营养不良基因座缺失的研究中首次引用了多重PCR的概念
E.多重PCR技术已被广泛应用于核酸诊断的各个领域,包括基因敲除分析、突变和多态性分析、定量分析及RNA检测
关于反转录病毒: (1)说明它们的特征。 (2)给出它们的病毒体中所包含的酶的名称,并列举该酶进行的3种生化活动。 (3)确定合成反转录病毒mRNA的模板。 (4)确定反转录病毒复制的胞内定位。 (5)指出反转录病毒中DNA插入机制与转座相关的特征。
A.无反应者为阴性
B.硬结平均直径<5mm为弱阳性
C.5mm≤硬结平均直径<10mm为一般阳性
D.10mm≤硬结平均直径<15mm为中度阳性
E.硬结平均直径≥15mm或局部出现双圈、水泡、坏死及淋巴管炎者为强阳性
A.反馈给员工的绩效评估结果应具体而不笼统
B.委婉引导,开始面谈的主题
C.进行绩效反馈时应避免使用极端化收的字眼
D.牢记面谈的目的和重点
A.对特定基因,模板DNA两条链均有转录功能
B.需要引物
C.是不对称性转录
D.σ因子识别转录起始点
E.对特定基因,只有一条链可以作为转录模板
A.它是戴震在地理方面的著述。
B.该书以中华历史文化为线索,叙述大地山川,且以水领山。
C.这本书科学地总结了古代天算的学术成就,表现出近代科学的研究精神。
D.书中一反传统地理著作“于古郡国为主而求山川”的研究方法,显现了独特的地理考证创见。
有人建议用PCR扩增同该蛋白质结合的微量DNA,思路是(图Q25.8):①合成一组长为26个碱基的随机序列的寡聚核苷酸混合体,在该序列的两侧各有一段25个碱基的序列作为PCR扩增的引物位点[图Q25.8(a)];②把这些寡聚核苷酸加到含有转录因子的细胞粗提取物中,转录因子可以同含有结合位点的寡聚核苷酸结合;③用转录因子特异的抗体分离同转录因子结合的寡聚核苷酸;④用PCR扩增选择到的寡聚核苷酸进行序列分析。
图Q25.8 用随机的寡聚核苷酸选择和扩增特异的DNA序列(a)用于选择的原初随机序列的寡聚核苷酸,N代表任何一种核苷酸;EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ位点有利于选择DNA的克隆和序列分析。(b)同序列特异的DNA结合蛋白结合的寡聚核苷酸的选择和序列分析方案按照这一思路,用0.2ng单链随机序列的寡聚核苷酸开始了这项实验,这个寡聚核苷酸可以同一个PCR引物结合成部分双链,经过如图Q25.8(b)所示的四轮选择和复制后,用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ消化分离到的DNA,将片段克隆到质粒中,并测定了10个独立的克隆(表Q25.1),问:
表Q25.1 10个克隆的序列
注:画线的序列是PCR引物部位,两种序列都是从BamH Ⅰ末端开始,所有序列中结合位点的方向都是相同的。