当载有文库的菌落被转移到杂交膜上用于筛选时,需要碱性溶液处理的步骤,这一步骤的意义何在?( )
A.促使文库DNA结合到杂交膜上
B. 启动杂交探针与互补序列间的反应
C. 标记DNA,便于检测
D. 刺激DNA复制,增加质粒拷贝数
E. 裂解菌体细胞,并使DNA变性
E、 裂解菌体细胞,并使DNA变性
A.促使文库DNA结合到杂交膜上
B. 启动杂交探针与互补序列间的反应
C. 标记DNA,便于检测
D. 刺激DNA复制,增加质粒拷贝数
E. 裂解菌体细胞,并使DNA变性
E、 裂解菌体细胞,并使DNA变性
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:
假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:
画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:
其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
指出参与转录的DNA片段以及该片段参与哪个mRNA的转录。内含子、外显子的分布与酶切片段之间有什么联系?
A.用限制酶消化DNA。
B.把DNA连接入一个载体。
C.在胶上分离DNA片段
D.把DNA片段转移到硝酸纤维素膜上。
E.膜与标记的探针杂交。
A.该多肽将转移到内质网上继续合成
B.该多肽将最终成为多次跨膜的膜蛋白
C.该多肽合成结束后将最终被定位到内质网膜上
D.该多肽将最终被运送至溶酶体而被降解
A.NADH直接穿过线粒体膜而进入
B.磷酸二羟丙酮被NADH还原成3-磷酸甘油进入线粒体,在内膜上又被氧化成磷酸二羟丙酮同时生成NADH
C.草酰乙酸被还原成苹果酸,进入线粒体再被氧化成草酰乙酸,停留于线粒体内
D.草酰乙酸被还原成苹果酸进人线粒体,然后再被氧化成草酰乙酸,再通过转氨基作用生成天冬氨酸,最后转移到线粒体外
A.蓝白斑筛选又称为α-互补
B.蓝白斑筛选中,单独的α片段与ω片段也具有活性的
C.α片段与ω片段可通过α-互补形成具有酶活性的β-半乳糖苷酶
D.在筛选培养基上,重组质粒的菌落是白色的,非重组质粒的菌落是蓝色的