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[单选题]

当载有文库的菌落被转移到杂交膜上用于筛选时,需要碱性溶液处理的步骤,这一步骤的意义何在?( )

A.促使文库DNA结合到杂交膜上

B. 启动杂交探针与互补序列间的反应

C. 标记DNA,便于检测

D. 刺激DNA复制,增加质粒拷贝数

E. 裂解菌体细胞,并使DNA变性

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E、 裂解菌体细胞,并使DNA变性

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第1题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于

人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:

假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:

画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:

其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。

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第2题
现已确定果蝇X染色体中一段DNA的限制酶图谱。成年果蝇的mRNA被分离出来,用电泳分开后,转移到硝酸
纤维素膜上。DNA片段A到G被用作探针,与膜进行杂交,结果如图所示:

指出参与转录的DNA片段以及该片段参与哪个mRNA的转录。内含子、外显子的分布与酶切片段之间有什么联系?

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第3题
以下哪个不是Southern blot的一个步骤?

A.用限制酶消化DNA。

B.把DNA连接入一个载体。

C.在胶上分离DNA片段

D.把DNA片段转移到硝酸纤维素膜上。

E.膜与标记的探针杂交。

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第4题
用下列方法进行重组体的筛选,只有()说明外源基因进行了表达。

A.Southem印迹杂交

B.Northem印迹杂交

C.Western印迹

D.原位菌落杂交

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第5题
1979年,Alwine等人将______分子从______转移到硝酸纤维素滤膜上,用标记的探针进行杂交实验,称______技术。
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第6题
如果一种多肽存在多个起始转移序列和多个停止转移序列,那么下列说法最确切的是______。

A.该多肽将转移到内质网上继续合成

B.该多肽将最终成为多次跨膜的膜蛋白

C.该多肽合成结束后将最终被定位到内质网膜上

D.该多肽将最终被运送至溶酶体而被降解

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第7题
从印迹上筛选所需要的菌落或噬菌体的探针有______和______两类。
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第8题
关于有氧条件下,NADH从胞液进入线粒体氧化的机制,下列描述中正确的是:()。

A.NADH直接穿过线粒体膜而进入

B.磷酸二羟丙酮被NADH还原成3-磷酸甘油进入线粒体,在内膜上又被氧化成磷酸二羟丙酮同时生成NADH

C.草酰乙酸被还原成苹果酸,进入线粒体再被氧化成草酰乙酸,停留于线粒体内

D.草酰乙酸被还原成苹果酸进人线粒体,然后再被氧化成草酰乙酸,再通过转氨基作用生成天冬氨酸,最后转移到线粒体外

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第9题
在精简基因组文库中,用标记的______同未标记的______杂交,最后建成的是______库。
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第10题
在已知序列的情况下获得目的DNA最常用的方法是( )

A.聚合酶链式反应

B.筛选基因组文库

C.筛选cDNA文库

D.化学合成法

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第11题
下列关于蓝白斑筛选说法错误的是()。

A.蓝白斑筛选又称为α-互补

B.蓝白斑筛选中,单独的α片段与ω片段也具有活性的

C.α片段与ω片段可通过α-互补形成具有酶活性的β-半乳糖苷酶

D.在筛选培养基上,重组质粒的菌落是白色的,非重组质粒的菌落是蓝色的

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