在DNA粗提取和鉴定的实验中,若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入洗涤剂的目的是()
A.利于DNA的溶解
B.分离DNA和蛋白质
C.溶解细胞膜
D.溶解蛋白质
A、利于DNA的溶解
A.利于DNA的溶解
B.分离DNA和蛋白质
C.溶解细胞膜
D.溶解蛋白质
A、利于DNA的溶解
A.在甘蔗茎的组织样液中加入双缩脲试剂,温水浴后液体由蓝色变成砖红色
B.在大豆种子匀浆液中加入斐林试剂,液体由蓝色变成紫色
C.提取DNA时,在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐,充分研磨,过滤并弃去滤液
D.将DNA粗提物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂,沸水浴后液体由无色变成蓝色
氮(N)和碳(C)在蛋白质中的含量比硫(S)要丰富得多,那么能否在Hershey和Chase实验中用放射性的N或C代替S来标记蛋白质,从而鉴定DNA是遗传物质?
A.肺炎双球菌活体转化实验证明DNA是使R型肺炎双球菌产生稳定遗传变化的物质
B.肺炎双球菌离体转化实验中提取的S型菌的DNA与R型活菌混合培养后可观察到两种菌落
C.赫尔希和蔡斯实验中搅拌的目的是裂解细菌释放出T2噬菌体
D.赫尔希和蔡斯实验中细菌裂解后得到的T2噬菌体都带有32P标记
有人建议用PCR扩增同该蛋白质结合的微量DNA,思路是(图Q25.8):①合成一组长为26个碱基的随机序列的寡聚核苷酸混合体,在该序列的两侧各有一段25个碱基的序列作为PCR扩增的引物位点[图Q25.8(a)];②把这些寡聚核苷酸加到含有转录因子的细胞粗提取物中,转录因子可以同含有结合位点的寡聚核苷酸结合;③用转录因子特异的抗体分离同转录因子结合的寡聚核苷酸;④用PCR扩增选择到的寡聚核苷酸进行序列分析。
图Q25.8 用随机的寡聚核苷酸选择和扩增特异的DNA序列(a)用于选择的原初随机序列的寡聚核苷酸,N代表任何一种核苷酸;EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ位点有利于选择DNA的克隆和序列分析。(b)同序列特异的DNA结合蛋白结合的寡聚核苷酸的选择和序列分析方案按照这一思路,用0.2ng单链随机序列的寡聚核苷酸开始了这项实验,这个寡聚核苷酸可以同一个PCR引物结合成部分双链,经过如图Q25.8(b)所示的四轮选择和复制后,用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ消化分离到的DNA,将片段克隆到质粒中,并测定了10个独立的克隆(表Q25.1),问:
表Q25.1 10个克隆的序列
注:画线的序列是PCR引物部位,两种序列都是从BamH Ⅰ末端开始,所有序列中结合位点的方向都是相同的。
由MNNG(亚硝基胍)引起的诱变损伤的本质以及它从DNA上被修复的机制可以用下面的实验来鉴定。为了确定诱变损伤的本质,未经处理的细菌和已用低剂量MNNG处理的细菌都在含50μg/ml的3H-MNNG的培养物中培养10min。分离它们的DNA并水解成核苷酸,然后经过纸层析分析放射性的嘌呤,结果如图Q12.2所示:
图Q12.2 层析法分离未被处理和已被低剂量MNNG处理的细菌DNA中被标记的甲基化嘌呤实线表示未被处理细菌DNA中的甲基化嘌呤;虚线表示MNNG处理的细菌所得结果
为了研究诱变损伤切除的机制,首先纯化负责切除的酶,把不同量的酶(相对分子质量19000)和已被3H标记含0.26pmol突变碱基的DNA一起温育,分析切除动力学。在不同时间取样,分析DNA以确定还存在多少突变残基(图Q12.3)。当在5℃而不是37℃时重复这个实验时,虽然最初的切除速率较慢,却得到一样的终点。
图Q12.3纯化的甲基转移酶把3H标记的甲基从DNA上切除所示为纯化酶的量