用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子,得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每条链的顺序,将5'-末端用32P标记(通过多核苷酸激酶催化的反应),再用Maxam-Gilbert序列法测定。切得片段的混合物经电泳后可得到如图2-3-50B所示的图谱(图中迁移方向为自上而下,片段越小移动距离越远)。仔细观察一下电泳图谱,回答下列问题:
四膜虫(Tetrahymena)是一种有两个胞核的有纤毛原生动物,小胞核(micronucleus)具有细胞染色体的主拷贝,其参与有性接合,但不参与日常基因的表达。大胞核(macronucleus)是一种由很多大小基因双链DNA片段形成的细胞基因组的“工作”拷贝(小染色体-minichromosomes),其参与基因转录,小染色体的许多拷贝中都有核糖体RNA的基因。可用梯度离心将其与其他小染色体分离,以进行进一步的研究。
通过电镜检测发现每个含核糖体基因小染色体为线性结构,长21kb。用琼脂糖凝胶电泳观察其仍为21kb(图16-3-24,泳道1)。如果用限制酶BglⅡ酶切小染色体,产生的两个片段13.4和3.8kb加起来不到21kb(图16-3-24,泳道2)。用其他限制酶酶切DNA,所得片段大小加起来仍旧不足21kb,而且每一种消化所产生的片段大小之和均不同。
如果未切割的小染色体在跑电泳之前先经过变性退火,那么21kb片段将被切割成正好是其一半的10.5kb。用双链片段代替(图16-3-24,泳道3),相似地,如果BglⅡ切割过的小染色体经变性和退火,则13.4kb片段将被其一半大小的6.7kb双链片段代替(图16-3-24,泳道4)。
请解释为什么限制酶切割下的片段加起来不是21kb?为什么经变性退火后其电泳形式就发生改变?你认为核糖体小染色体的序列是什么样的?
A.小王想到周六那天先学习一上午,下午再打篮球。
B.小孙到文具店看中了一支标价10元的钢笔和一本标价15元的笔记本,但是他只带了20元钱。
C.小李发现妈妈做了他最喜欢吃的红烧肉和最不喜欢吃的清炒苦瓜。
D.小张很想当班长,但是又怕当班长会占用学习时间,影响学习。
A.后有追兵,前遇大河
B.是否将病情告诉身患癌症的病人
C.鱼与熊掌不可兼得
D.樱桃好吃树难栽
A.终产物是乳酸
B. 催化反应的酶系存在于胞液和线粒体中
C.通过氧化磷酸化生成ATP
D. 不消耗ATP,同时通过底物磷酸化产生ATP
E. 反应都是可逆的
A.后有追兵,前遇大河
B.是否将病情告诉身患癌症的病人
C.鱼与熊掌不可兼得
D.樱桃好吃树难栽