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当两种限制酶反应条件不同时,若要用双酶切,应采取什么措施?为什么?

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第1题
用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子,得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每

用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子,得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每条链的顺序,将5'-末端用32P标记(通过多核苷酸激酶催化的反应),再用Maxam-Gilbert序列法测定。切得片段的混合物经电泳后可得到如图2-3-50B所示的图谱(图中迁移方向为自上而下,片段越小移动距离越远)。仔细观察一下电泳图谱,回答下列问题:

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第2题
四膜虫(Tetrahymena)是一种有两个胞核的有纤毛原生动物,小胞核(micronucleus)具有细胞染色体的主拷贝,其参

四膜虫(Tetrahymena)是一种有两个胞核的有纤毛原生动物,小胞核(micronucleus)具有细胞染色体的主拷贝,其参与有性接合,但不参与日常基因的表达。大胞核(macronucleus)是一种由很多大小基因双链DNA片段形成的细胞基因组的“工作”拷贝(小染色体-minichromosomes),其参与基因转录,小染色体的许多拷贝中都有核糖体RNA的基因。可用梯度离心将其与其他小染色体分离,以进行进一步的研究。

通过电镜检测发现每个含核糖体基因小染色体为线性结构,长21kb。用琼脂糖凝胶电泳观察其仍为21kb(图16-3-24,泳道1)。如果用限制酶BglⅡ酶切小染色体,产生的两个片段13.4和3.8kb加起来不到21kb(图16-3-24,泳道2)。用其他限制酶酶切DNA,所得片段大小加起来仍旧不足21kb,而且每一种消化所产生的片段大小之和均不同。

如果未切割的小染色体在跑电泳之前先经过变性退火,那么21kb片段将被切割成正好是其一半的10.5kb。用双链片段代替(图16-3-24,泳道3),相似地,如果BglⅡ切割过的小染色体经变性和退火,则13.4kb片段将被其一半大小的6.7kb双链片段代替(图16-3-24,泳道4)。

请解释为什么限制酶切割下的片段加起来不是21kb?为什么经变性退火后其电泳形式就发生改变?你认为核糖体小染色体的序列是什么样的?

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第3题
双趋冲突:是指两种对个体都具有吸引力的需要目标同时出现,而由于条件限制,个体无法同时采取两种行动所表现出的动机冲突。

A.小王想到周六那天先学习一上午,下午再打篮球。

B.小孙到文具店看中了一支标价10元的钢笔和一本标价15元的笔记本,但是他只带了20元钱。

C.小李发现妈妈做了他最喜欢吃的红烧肉和最不喜欢吃的清炒苦瓜。

D.小张很想当班长,但是又怕当班长会占用学习时间,影响学习。

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第4题
HaeⅢ酶是“错切型”的限制酶,EcoR Ⅰ酶是“平切型”的限制酶。
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第5题
下面限制酶属于“平切型”的是______。

A.EcoRⅠ酶

B.HindⅢ酶

C.Hac酶

D.EcoRⅡ酶

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第6题
什么是限制性核酸内切酶?第二型限制酶有何特点?

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第7题
双趋冲突:是指两种以上都具有吸引力的需要目标同时出现,而由于条件限制,个体无法同时采
取两种行动所表现出的动机冲突。

下列属于双趋冲突的是()。

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第8题
有效的AFLP扩增数量是由酶切频率较低的限制酶在基因组中的酶切位点数量和选择性引物碱基决定的。
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第9题
双趋冲突:指两种对个体都具有吸引力的需要目标同时出现,但由于条件限制,个体无法同时采取两种行动所表现出的动机冲突。 下列属于双趋冲突的是()。

A.后有追兵,前遇大河

B.是否将病情告诉身患癌症的病人

C.鱼与熊掌不可兼得

D.樱桃好吃树难栽

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第10题
有关糖的元氧酵解过程可以认为()

A.终产物是乳酸

B. 催化反应的酶系存在于胞液和线粒体中

C.通过氧化磷酸化生成ATP

D. 不消耗ATP,同时通过底物磷酸化产生ATP

E. 反应都是可逆的

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第11题
:双趋冲突:指两种对个体都具有吸引力的目标同时出现,而由于条件限制,个体无法同时采取两种行动所表现出的动机冲突。 下列属于双趋冲突的是()。

A.后有追兵,前遇大河

B.是否将病情告诉身患癌症的病人

C.鱼与熊掌不可兼得

D.樱桃好吃树难栽

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