噬菌体中DNA分子具有短的互补的单链末端,当它感染细菌时该分子环化。图16-3-7的A和B分别显示用Bam限制酶处理游离的DNA分子后得到的限制酶图谱和凝胶电泳条带。从受感染的细胞中分离出DNA进行特性研究。在某些条件下酶解后的片段经电泳后结果如图16-3-7C所示。试问在这些条件下DNA呈怎样的结构?
mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上,加上放射性标记的RNA,然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上,所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中,从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA,然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示,其中的数字表示离DNA左侧的距离,相对距离范围为0~100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验,吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase,该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA);另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录?
表9-3-10 | ||
滤膜上的DNA | 滤膜上的cpm | |
-RNase | +RNase | |
Ⅰ Ⅱ Ⅲ | 1250 1260 1240 | 1245 418 820 |
如果线状DNA分子按Y结构复制,根据DNA和大肠杆菌DNA聚合酶的哪些特征才使两条链的复制不能以同一方向伸展(如图6-3-28所示)?细胞怎样解决了这个问题?
两份几乎相同的DNA样品(例如从突变型和野生型病毒X得到的DNA分子)混合、变性、再退火,可得如图2-3-24所示的同源双链和异源双链。同源双链含来自同一份DNA样品的两条链,而异源双链则含来自两份不同DNA样品的链。两份DNA样品的顺序差异导致了异源双链中因不能形成氢键配对而保持单链状态的非互补区域。若这些区域长度大于50至100个核苷酸;则在电镜下呈环状。图B显示两种常见的异源双链结构。异源双链DNA的检测对于大片段缺失、碱基添加以及取代的定位是很有效的方法。试利用图中的数据构建一个野生型DNA的图谱,算出突变型中片段缺失的位置。
人类腺病毒引起上呼吸道感染。该病毒具分子量为20×106U的双链DNA。当DNA的轻、重两链分离并在电镜下观察时,其结构如图2-3-44所示。若此单链DNA用核酸外切酶Ⅲ预处理,那么这些环状结构就会消失。问腺病毒DNA具何种结构?
将下列DNA分子按熔链温度由低至高列序:
Ⅰ.A A G T T C T C T G A A
T T C A A G A G A C T T
Ⅱ.A G T C G T C A A T G C A G
T C A G C A G T T A C G T C
Ⅲ.G G A C C T C T C A G G
C C T G G A G A G T C C
用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子,得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每条链的顺序,将5'-末端用32P标记(通过多核苷酸激酶催化的反应),再用Maxam-Gilbert序列法测定。切得片段的混合物经电泳后可得到如图2-3-50B所示的图谱(图中迁移方向为自上而下,片段越小移动距离越远)。仔细观察一下电泳图谱,回答下列问题:
许多DNA分子的一条链上有长段的嘧啶(自然,另一条链上有长段的嘌呤)。如果将DNA在多聚核糖嘌呤存在的条件下变性,然后在硫酸铯溶液中进行浮力密度离心至平衡,该变性DNA经常形成两条带。已知RNA的密度大约比DNA的密度大0.100g/ml。试解释为什么出现两条带,每条带是什么物质,如果多聚核糖嘌呤的分子量增加,两条带的分离程度会增加还是降低?