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[主观题]
用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ分别切割同一来源的染色体DNA，并进行克隆。在前者的克隆中筛选到A基因，但在后者的克隆中未
筛选到A基因，请说明原因。
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(1)EcoRⅠ到HindⅢ位点间的片段有多大？ (2)画出HhaⅠ和Sau3A的酶切位点。 (3)标记有32p的同样DNA片段，用HhaⅠ完全酶切，进行电泳，那么用EB染色或放射自显影，会分别得到什么样的图？
A.体内突变
B. 完全酶切后连接
C. 部分酶切
D. 先用甲基化酶修饰后再酶切
片段重新连接起来，得到如图Q25.1所示的结果。
图025.1杂合基因的结构
于是将这两种片段混合起来，并在连接酶的存在下进行温育，分别在30min和8h取样进行凝胶电泳分析。令人惊讶的是，连接产物并非是理想中的1.3kb的重组分子，而是一种复杂的片段模式[图Q25.2(a)]。同时发现随着温育时间的延长，较小片段的浓度逐渐降低，大片段的浓度逐渐增加。如果用BamH Ⅰ来切割连接后的混合物，则起始的片段可以重新产生[图Q25.2(a)]。
从凝胶中分离纯化出1.3kb的片段，并取出一部分用BamH Ⅰ进行切割，以检查它的结构。正如预料的一样，出现了两个原始的带[图Q25.2(b)]。但是用EcoR Ⅰ切割另一部分样品，希望能够产生两个300bp和一个长度为700bp的核苷酸片段，然而，凝胶电泳的结果，令人惊奇[图Q25.2(b)]。
图Q25.2纯化DNA片段连接后电泳检测
下列限制酶哪个或哪些可以准确切割下一段cDNA？这段cDNA可以编码多肽KIGPACF(N代表任一种核苷酸)。
限制酶 识别序列
AluI AGCT
Sau96I GGNCC
HindⅢ AAGCTT
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检测减数分裂产物。下表给出了每种类型分别与探针A和B杂交的DNA片段：
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(1)这些不同孢子DNA如何产生？ (2)画出对应的染色体区域。
A.用两种限制酶分别切割运载体和人类胰岛素基因
B.用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌
C.通过受体表现出来的外在性状来检测重组DNA是否已导入受体细胞
D.重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人类胰岛素
用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子，得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每条链的顺序，将5'-末端用32P标记(通过多核苷酸激酶催化的反应)，再用Maxam-Gilbert序列法测定。切得片段的混合物经电泳后可得到如图2-3-50B所示的图谱(图中迁移方向为自上而下，片段越小移动距离越远)。仔细观察一下电泳图谱，回答下列问题：
用同一浓度的H2C2O4标准溶液，分别滴定等体积的KMnO4和NaOH两种溶液，化学计量点时如果消耗的标准溶液体积相等，说明NaOH溶液的浓度是KMnO4溶液浓度的5倍。( )
