题目内容
（请给出正确答案）
[主观题]
限制酶切反应结果显示为部分切割，可能原因是()
限制酶切反应结果显示为部分切割，可能原因是（)
A.限制酶失活
B.有抑制剂如SDS，EDTA等存在
C.反应条件不合适
D.DNA不纯
E.DNA结构(线形或超螺旋)的影响
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果蝇中P因子的转座酶由4个外显子(0，1，2，3)编码。此基因在生殖细胞中的转录产物长度为2．1 kb，包含所有这4个外显子，并编码具有转座酶活性的蛋白质。体细胞中P因子的转录产物长度为2．5 kb，除了含有全部的4个外显子之外，位于外显子2和3之间的内含子也被保留下来。 (1)体细胞中产生的较长的mRNA编码的蛋白质的大小只相当于在生殖细胞中产生的较短的转录产物编码的蛋白质的75％。较长的转录产物为什么会编码较小的蛋白质产物？ (2)反转录酶能够用来从mRNA合成得到相应的双链DNA，这个DNA拷贝称为cDNA。如何利用cDNA和转基因技术得到在体细胞中也有转座酶活性的果蝇？ (3)假设用限制酶SaZ工消化P因子后得到8个片段。用来自果蝇生殖细胞的转座酶的cDNA作为探针对它们进行Southern杂交，结果发现所有的8个限制酶切片段都显示阳性条带。上述结果说明了什么？
用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子，得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每条链的顺序，将5'-末端用32P标记(通过多核苷酸激酶催化的反应)，再用Maxam-Gilbert序列法测定。切得片段的混合物经电泳后可得到如图2-3-50B所示的图谱(图中迁移方向为自上而下，片段越小移动距离越远)。仔细观察一下电泳图谱，回答下列问题：
图Q2.7 从一个起点开始的双向复制
(1)复制起点是单个还是多个？
(2)复制是单向还是双向？
从正常细胞和反转录病毒(不含癌基因)感染的细胞(克隆1)中，分别分离出DNA，用限制酶酶切后做电泳并转膜。以某原癌基因的cDNA作探针进行杂交，结果如下图所示：
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反转录病毒插入位置在哪里？
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后，连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间，二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1)，分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后，电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后，用载体上的DNA作为探针进行杂交，结果如下图所示：
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假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点，标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2)，用同样的酶切、电泳、转膜后，以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交，结果如下图所示：
2.jpg)
画出克隆2的图，标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切，并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交，结果如下图所示：
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其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
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(1)EcoRⅠ到HindⅢ位点间的片段有多大？ (2)画出HhaⅠ和Sau3A的酶切位点。 (3)标记有32p的同样DNA片段，用HhaⅠ完全酶切，进行电泳，那么用EB染色或放射自显影，会分别得到什么样的图？
图Q25.10 10kb片段二种酶切图谱
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指出参与转录的DNA片段以及该片段参与哪个mRNA的转录。内含子、外显子的分布与酶切片段之间有什么联系？
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